一、藥廠設計之凝膠過濾層析
凝膠過濾是基于分子大小不同而進行分離的一種層析技術,一般情況下,均指液相柱層析。其通用的名稱還有凝膠滲透層析、分子篩層析、排阻層析等。
如果保證柱床高度、線性流速及原料濃度不變,凝膠過濾層析工藝可平穩地由小量試驗放大至中試及大生產規模。目前已有大至2500L柱床的凝膠過濾層析工藝應用于大規模生產之中凝膠過濾層析的關鍵在介質或填料的選擇上,應從分離目的和需分離的物質分子大小兩方面進行綜合考慮。
為將原料中的目的組分按預期目標分離出來,并達到要求的產量和分離效率,需要對分辨率、層析時間、進料量等方面因素做綜合考慮,全面設計凝膠過濾工藝方法。要達到足夠的分辨率并不困難,設計重點可放在提高純化的效率方面,如怎樣獲得最大回收率,怎樣使收集的組分稀釋程度降至最低,還有如何使層析時間縮至最短等
二、藥廠設計之反相層析和疏水作用層析
反相層析和疏水作用層析都是基于物質分子的疏水基團與層析介質上的疏水基團相互作用在非極性的固定相和極性的流動相之間重新分配而得以分離的技術。兩者的基本差別主要在于介質功能基團疏水性的強弱程度不同,反映在疏水側鏈的長度及其在介質骨架上的密集程度兩個方面。疏水性強的稱為反相層析,而較弱的則稱為疏水作用層析。
在疏水作用層析和反相層析中,當不同疏水性的目的分子吸附到介質上之后,主要通過降低鹽濃度或增加流動相的極性來減少目的分子與介質之間的疏水作用達到解吸和洗脫的目的。由于不同目的分子疏水性不同,因而與介質之間的作用強度也就不同,因此在梯度洗脫時便可相互分離。